位點特異性基因修飾通常使用內源DNA與外源DNA的同源重組(HR)?;蚓庉嫾夹g源自小鼠胚胎干細胞(ESC)中的DNA同源重組技術(HR),隨著基于DNA核酸酶基因編輯技術(包括鋅指核酸酶(ZFN)和新興的CRISPR/Cas9技術)的出現,已經發展到一個新的階段。與ZFN和TALEN相比,CRISPR/Cas9技術效率更高,縮短了制備時間,降低了生產成本,打破了物種限制,還具有直接編輯患者組織中基因的潛力。

百奧賽圖開發了一種基于CRISPR / Cas9的EGE?系統,該系統將大小鼠和細胞系的DNA大片段(> 5 kb)敲進效率提高近20倍。EGE?技術在課題中獲得98%成功率,最大程度地縮短了制備基因編輯動物和細胞系模型的周期。

技術優勢應用服務周期
基于CRISPR / EGE?的基因編輯高效率; 大片段基因敲除/敲進能力;同時靶向多個基因;適用于許多物種;易于構建。通過選擇合適的sgRNA可以降低脫靶效應,并通過育種消除。Southern blot篩選出隨機插入。大片段敲除小鼠/大鼠6-8個月
條件性敲除小鼠/大鼠
ROSA26位點基因敲入小鼠/大鼠
基因敲入 /點突變小鼠/大鼠
人源化小鼠/大鼠
報告基因敲進/先全敲后條敲小鼠/大鼠
常規細胞系敲除 / 敲入
hESC / iPS細胞敲除 / 敲入
基于ESC / HR的基因編輯迄今為止建立的準確,精確和可靠的唯一可以滿足幾乎所有基因組修飾需求的基因編輯技術; 受到ES細胞限制(只有小鼠ES細胞可以使用此技術,不能應用于其他動物模型); 耗時;工作量大;成本高大片段基因敲除小鼠7-11個月
條件性敲除小鼠
ROSA26位點基因敲入(KI)小鼠
基因敲入/點突變小鼠
人源化小鼠
報告基因敲進/先全敲再條敲小鼠
Tol2轉基因技術傳統的轉基因技術因其快速、低成本、超大片段插入等優點而受到歡迎,但隨著新的基因編輯技術的發展,尤其是EGE?,上述優勢變得不太明顯。尤其是隨機插入,不穩定,后代擴繁鑒定需要耗費大量的人力物力轉基因小鼠/大鼠2-3個月獲得F0代
染色體工程Mb級的基因簇替換技術。獨特的高科技技術,可用于特殊用途,例如抗體基因簇的人源化。小鼠非常高科技
其他服務除了全面的基因編輯服務,
Biocytogen還提供與基因編輯有關的里程碑式服務。
CRISPR質粒構建; sgRNA活性檢測; 供體質粒構建



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